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科研體系

致力于生命研究、生物檢測技術(shù)的多領(lǐng)域開(kāi)發(fā)

基因克隆概述

基因克?。╣ene cloning)是將提取或合成的目的基因,與具有自主復制能力的載體(vector)基因拼接重組,并導入受體細胞進(jìn)行無(wú)性繁殖從而形成新的基因分子的過(guò)程。
自上世紀七十年代創(chuàng )建第一個(gè)重組DNA分子克隆以來(lái),基因克隆成為分子生物學(xué)的核心技術(shù),促進(jìn)了生物分子學(xué)進(jìn)步,也有力推動(dòng)了生物醫學(xué)研究和產(chǎn)業(yè)的快速發(fā)展。

目的

基因克隆技術(shù)首先有助于精準分析目的基因的表達與調控、蛋白相互作用,包括調控元件、轉錄因子研究以及非編碼RNA研究等;其次,可以用于難以獲取的天然蛋白的大規模生產(chǎn);然后,可用于定型改造生物基因組結構,使之具有更大應用前景。此外,近年來(lái)隨著(zhù)基因測序與分析需求的增長(cháng)和新一代測序技術(shù)(NGS)的發(fā)展,基因克隆技術(shù)也發(fā)揮著(zhù)日益重要的作用。

分類(lèi)

根據基因克隆的類(lèi)型,可以分為以下三大類(lèi):
一、經(jīng)典基因克隆,需要限制性?xún)惹忻负瓦B接酶。這也是目前應用最為廣泛的基因克隆手段,具有操作簡(jiǎn)便的特點(diǎn),但受制于限制性?xún)惹忻该盖形稽c(diǎn)和連接酶效率,一般適合于小片段基因克隆。
二、需要修飾酶的基因克隆,不需要限制性?xún)惹忻负瓦B接酶,提高了基因克隆的靈活性和應用空間,如UDG(尿嘧啶DNA糖基化酶)克隆法,具有操作簡(jiǎn)單、克隆效率高的特點(diǎn)。
三、需要重組酶的基因克隆,利用重組酶及其特異識別位點(diǎn),實(shí)現快速、高效的靶向克隆,不僅可實(shí)現高通量克隆,還可適合于原核生物、酵母、昆蟲(chóng)細胞及哺乳動(dòng)物細胞等多系統的表達載體。目前,基于重組酶的基因克隆技術(shù),如GateWay技術(shù)和Golden Gate技術(shù)等得到普遍關(guān)注。

方法

經(jīng)典的基因克隆方法主要包括:目的基因制備、限制性?xún)惹忻赶懈钅康幕蚝洼d體、用DNA連接酶連接酶切后的基因和載體,制備DNA重組體;將DNA重組體導入宿主細胞、篩選克隆及鑒定以及目的基因在宿主細胞中的擴增和表達等步驟。

  • 技術(shù)特點(diǎn)

    我公司已建立了成熟完整的基因克隆研發(fā)平臺,不僅擁有多種克隆載體與表達載體,還有不同類(lèi)型的宿主細胞,以及完善的基因操作流程和規范,保證了目的基因的準確高效克隆。特別是在基因密碼子優(yōu)化、表達載體的設計和構建、融合對象和標簽的選取等方面具有豐富的經(jīng)驗,實(shí)現了多種蛋白在原核表達系統中高通量、高純度、高穩定性的表達。

  • 咨詢(xún)電話(huà):0755-26650513

  • 郵箱:sale@biocbd.com

  • 深圳市南山區粵海街道高新中一道 長(cháng)園新材料港1棟六層南側

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