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科研體系

致力于生命研究、生物檢測技術(shù)的多領(lǐng)域開(kāi)發(fā)

蛋白標記概述

蛋白標記(protein labeling)是通過(guò)體內或者體外方法將標記物與目的蛋白結合的技術(shù)。標記后的蛋白仍保持蛋白活性,標記物既可以作為示蹤劑指示與蛋白相關(guān)的反應,也可以作為干預物作用于目標蛋白或者細胞。隨著(zhù)近年技術(shù)發(fā)展,尤其是綠色熒光蛋白(GFP,green fluorescent protein)的發(fā)現和應用,蛋白標記技術(shù)在生命科學(xué)領(lǐng)域發(fā)揮著(zhù)越來(lái)越大的作用。

目的

標記蛋白不僅可以作為監測生命過(guò)程、檢測目的靶物的分析檢測手段,也可以通過(guò)利用蛋白活性和標記物作用作為干預及治療的手段。近年來(lái),已利用重組單克隆抗體偶聯(lián)放射性同位素、免疫毒素或化學(xué)藥物,成功制備了精準治療的靶向藥物,為腫瘤及自身免疫病等重大疾病治療提供了新型工具。

分類(lèi)

根據標記物的類(lèi)型可以分為放射性同位素標記、熒光素/熒光蛋白標記、酶標記、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)(包括吖啶酯、魯米諾等)標記、納米材料(膠體金、膠體硒、乳膠微球、量子點(diǎn)等)標記等。

方法

蛋白標記方法需根據蛋白自身性質(zhì)和標記物類(lèi)型建立相應的技術(shù)方案:
1、放射性同位素標記:具有靈敏度高、特異性強、適用性廣、定位準確等特點(diǎn),常用的同位素包括125I、131I、32P等。同位素標記的關(guān)鍵在于,測定放射性強度的條件和合適的比活度。標記過(guò)程包括實(shí)驗準備、標記實(shí)驗及放射性廢物處理等階段。
2、熒光標記:將熒光材料與目標蛋白結合,形成熒光結合物。熒光材料包括熒光素(FITC、羅丹明、5-FAM等)、自發(fā)熒光蛋白、納米晶體材料(量子點(diǎn))等。標記方法也根據各類(lèi)熒光材料的不同性質(zhì),有很大差異。
3、酶標記:常見(jiàn)標記用的酶分子包括辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶及葡萄糖氧化酶等。采取的偶聯(lián)方法包括:戊二醛法、苯醌法、偶氮法等。
4、生物素(biotin)標記:生物素分子量小,對蛋白質(zhì)自身活性影響小,重要的是,生物素與親和素(avidin)有很高的親和力,可以大幅度提高檢測靈敏度。因此,生物素標記已成為一種常用而有效的蛋白標記技術(shù)手段。
5、其它標記方法:熒光蛋白可通過(guò)基因水平操作,將熒光蛋白基因與目的蛋白基因重組,再表達重組蛋白。納米顆粒還可通過(guò)物理方法吸附蛋白,形成標記物。

  • 技術(shù)特點(diǎn)

    現已開(kāi)發(fā)了多種蛋白標記技術(shù),以此為基礎成功建立了高靈敏度、高特異性、穩定方便的生物檢測工藝平臺,適用于ELISA、免疫化學(xué)發(fā)光、納米金/熒光微球免疫層析等免疫檢測產(chǎn)品開(kāi)發(fā)。我公司建立的酶蛋白標記技術(shù)具有高標記率、高活性、高純度等特點(diǎn),能夠適用于各類(lèi)不同類(lèi)型的蛋白分子的標記。目前還開(kāi)發(fā)了熒光微球標記技術(shù),標記微球粒度均一、單分散性好、發(fā)光效率高,具有靈敏度高、線(xiàn)性范圍寬等特點(diǎn),可廣泛應用于高通量免疫檢測與分析、基因檢測等方面。

  • 咨詢(xún)電話(huà):0755-26650513

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